ABI7900熒光定量PCR儀

一、ABI7900熒光定量PCR儀(yi) 是繼7700、5700型熒光定量PCR儀(yi) 之後，ABI公司推出的高通量實時熒光定量PCR係統。它是兼容96孔板和384孔板的熒光定量PCR儀(yi) ，也是可選手工進樣和自動進樣的熒光定量PCR儀(yi) 。7900HT型熒光定量PCR儀(yi) 可滿足從(cong) 中通量到高通量實驗的需求。  

二、ABI7900熒光定量PCR儀(yi) 主要特點:  

（1）高效平台-7900HT係統是為(wei) 支持高通量而構建的，光學係統經優(you) 化以適用於(yu) 384孔板熒光信號的激活和實時檢測。  

（2）結果可靠-7900HT係統采用了與(yu) 7700、5700相同的定量原理，利用Ct值（Ct定義(yi) 為(wei) 在基線上方產(chan) 生可檢測到的統計學上顯著的熒光發射的這一PCR循環）和起始拷貝數的對應關(guan) 係，通過外標準曲線精確計算未知樣品的起始拷貝數。  

（3）高度重現性-7900HT係統的熒光檢測發生在PCR對數期的起始，因此反應管中各組分沒有任何限製反應因素，從(cong) 而確保檢測結果都是精確並能重複的。  

（4）先進的熒光檢測技術-RISM®7900HT熒光定量PCR係統在不降低速度、分辨率的情況下有效提高了產(chan) 率，這是基於(yu) 先進的熒光檢測技術：一束激光掃描並激活384個(ge) 孔的每一個(ge) 孔裏的熒光染料，熒光信號通過光柵分光，經過分離的多色熒光同時到達CCD攝像機，實現多色熒光同時檢測。  

（5）自動進樣裝置-7900HT係統配備有自動化配件可取得高效率。自動化裝置可容納84塊384孔板，機械手臂可按一定順序將待測樣品板運送至主機內(nei) ，配備的條形碼閱讀器（Barcodereader）可自動識別進入主機的樣品板編號，使你在任何時間可以在樣品行列中插入或替代樣品板。  

（6）多樣的化學試劑-7900HT型熒光定量PCR儀(yi) 上可使用的化學試劑包括TaqMan熒光探針法和SYBRGreen熒光染料法。TaqMan探針法具有高度的靈敏度和特異性，適用於(yu) 實時定量的多重反應或單核苷酸多態性分析（SNP）。SYBRGreen染料應用於(yu) 目標鑒定（篩選測定）或者在隻需用少數幾個(ge) 反應的測定中為(wei) 理想。  

（7）有效防汙染-7900HT係統在PCR全過程中使用專(zhuan) 門設計的和始終密閉的樣品管。在加入樣品和試劑後這些管子便立即封閉並在擴增和檢測過程中保持這種狀態，這樣就可以大大地減少汙染的機會(hui) ；此外，7900HT係統不存在PCR後處理，有效防止擴增產(chan) 物對實驗環境的汙染而造成的假陽性。  

（8）多種定量方法-ABIPRISM®7900HT序列檢測係統軟件為(wei) 基因表達提供一種定量化方法。定量是從(cong) 一個(ge) 標準曲線上直接測定目標（基因）的量。相對定量方法是通過與(yu) 標定樣品相比較而計算未知樣品的量，不需要標準曲線。  

三、原理介紹：  

1.定量，為(wei) 了測定未知樣品中的目標（基因）的數量，7900HT係統可用來測定樣品的CT，然後用一條標準曲線來測定起始的拷貝數。在標準曲線的繪製中，7900HT係統軟件首先用已知的起始拷貝數的幾種稀釋度計算它們(men) 的CT值。接著，軟件使用測得的CT值對應於(yu) 起始拷貝數的對數值作圖。至少在五個(ge) 數量級範圍中兩(liang) 者呈線性關(guan) 係。  

2.相對定量，對於(yu) 基因表達研究來說，相對定量是理想的方法。這裏不是應用標準曲線而是相對於(yu) 標定樣品計算表達水平。用一個(ge) 內(nei) 源對照來標定樣品的量。這一方法與(yu) 7900HT係統在一個(ge) 多重反應中能同時對目標和內(nei) 源對照進行定量測定的能力相結合，可實現高效、高通量的基因表達研究。  

3.有效的SNP檢測手段，除實時定量測定以外，7900HT係統包括對於(yu) 已知的單一核苷酸多態性（SNPS）作大規模篩選的軟件。在一對等位基因係統中，用對應於(yu) 兩(liang) 個(ge) 等位基因的兩(liang) 個(ge) TaqMan探針在同一個(ge) 試管中做多重PCR反應。反應終止時所產(chan) 生的熒光用7900HT係統進行測定，實驗結果通過分析軟件迅速取得。  

四、儀(yi) 器規格和技術指標:  

（1）係統組成，7900HT熒光定量PCR儀(yi) －384孔或96孔可更換式半導體(ti) 控溫PCR儀(yi) ，488nm長壽氬離子激光器，X,Y雙軸同步熒光掃描頭。  

（2）光柵和CCD檢測裝置，自動進樣裝置，DELLGX270電腦，Windows2000操作係統，儀(yi) 器控製，數據采集及結果分析軟件，PrimerExpress引物探針設計軟件。  

（3）大產(chan) 率，實時定量檢測－5000樣品/天（標準模式），96樣品/35分鍾（快速模式），終點SNP分析－30000樣品/2.5小時。  

（4）裝機指標，以99.7%的置信度明確區分濃度差別兩(liang) 倍（5000和10000拷貝）的樣品的定量結果試劑和消耗品。  

（5）完備的通用基本試劑盒和消耗品，十二萬(wan) 種TaqmanGeneExpressionAssays人、大鼠、小鼠基因組基因表達分析試劑盒，二百萬(wan) 種TaqmanValidatedSNPGenotypingAssays人、大鼠、小鼠基因組SNP檢測試劑盒。  

（6）Taqman低密度表達譜芯片，CustomAssays代客設計、合成引物探針服務。